1、層流手術室的墻壁和天花板采用隔音、堅固、光滑、無縫隙、防火、防濕、易清洗的材料。淺藍色，淺綠色為宜。燈、柜、操作臺等應設置在墻內。墻面與平頂、墻面與地面、不同墻面與墻面交叉處的陰(陽)角應做成小圓角結構(R≥50mm)，避免積塵，便于清潔。
2、門應寬，無門檻，凈寬不小于1.4m，便于平車進出，應避免使用易擺動的彈簧門，防止灰塵和氣流飛揚。層流手術室應采用電動懸掛式自動感應門，配有自動延時關閉裝置。窗戶應雙層，鋁合金窗框，有利于防塵保溫。
3、層流手術室凈高應為2.8-3m，走廊寬度應不小于2.5m，便于平車運行，避免人員碰撞。
4、層流手術室應采用堅硬、光滑、易刷洗的材料建造。地漏略傾斜于一角的低處，有利于排放污水，覆蓋排水孔，避免污染空氣進入房間或被異物堵塞。應光滑、光滑、耐腐蝕（酸、堿、藥）、易清洗，可選用橡膠、聚氨酯涂料、樹脂板等，接縫少，可避免污垢堆積，耐污易清洗，圖案多樣，安裝更換方便。
5、電源：雙相供電設施運行。手術室應有足夠的電插座，方便各種儀器設備的供電。插座應配備防火裝置，手術室地面應配備導電設備，防止火花爆炸。電插座應密封，防止進水，避免電路故障影響手術。總電源線集中在墻內，中央吸引和氧氣管道裝置應設在墻內。
6、照明設施：墻壁或屋頂應安裝普通照明燈。手術照明燈應安裝子母無影燈和備用升降照明燈。
7、層流手術室水源及防火設施：各工作室應安裝自來水龍頭，便于沖洗。走廊和輔助房間應配備滅火器，冷熱水和高壓蒸汽應充足。
8、通風過濾裝置：現代層流手術室應建立完善的通風過濾裝置，凈化空氣。通風方式有湍流式、層流式、垂直式，可酌情選擇。
(9)層流手術室出入線路布局：出入線路布局設計應滿足功能流程和污染清潔分區的要求，應設置三條出入線路，一條是工作人員的出入線路，另一條是傷病人的出入線路，第三條是設備敷料等循環供應線路，盡量隔離，避免交叉感染。
